【摘 要】
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MicroRNAs(miRNAs)是多种疾病的生物标志物,同时也能为疾病治疗提供潜在靶点,因此,发展简单、快速、灵敏的miRNAs分析方法具有十分重要的意义.本研究结合杂交链式反应(HCR)高
【机 构】
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武汉大学化学与分子科学学院,武汉430072
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MicroRNAs(miRNAs)是多种疾病的生物标志物,同时也能为疾病治疗提供潜在靶点,因此,发展简单、快速、灵敏的miRNAs分析方法具有十分重要的意义.本研究结合杂交链式反应(HCR)高的信号放大能力和以DNA为模板合成的银纳米簇(DNA-AgNCs)优异的发光性能,构建了一种免标记的通用型荧光传感器,实现了miRNA-21的快速灵敏检测.将合成银纳米簇(AgNCs)的DNA模板封闭在HCR的反应物(发夹DNA)中,当存在靶标DNA时,发夹DNA的杂交链式组装反应被引发,释放出大量自由的AgNCs模板序列,进而引发近红外荧光DNA-AgNCs的合成,AgNCs的近红外荧光信号强度与引发链DNA的浓度成正相关.进一步通过在检测系统中引入一个封闭有HCR引发链序列的辅助发卡序列,建立通用型HCR-AgNCs传感分析系统,用于靶核酸分子检测.以miRNA-21为模型分析物,只在miRNA-21存在时,此辅助发卡才能被打开,并生成自由的HCR引发链,进而引发HCR反应和AgNCs的合成.本方法检测miRNA-21的线性范围为250 pmol/L～8 nmol/L,线性方程为(F-F0)/F0=-0.500+0.235 lg(C(pmol/L))(R2=0.9792),检出限(3σ/S)为19.9 pmol/L.这种基于HCR-AgNCs的检测方法具有免标记、简单、灵敏的优点,可作为通用的核酸传感平台,有望为疾病的临床诊断和治疗提供重要参考.
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