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目的
建立基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定非结核分枝杆菌(NTM)的方法,评估其快速鉴定临床和环境分离NTM的可行性、准确性和重复性。
方法回顾性收集2012年1至3月上海复旦大学附属中山医院微生物实验室临床分离NTM 15株及2011至2012年医院供水系统环境分离NTM 68株。比较3种样本前处理和蛋白抽提方案,采用MALDITOF MS技术检测临床和环境分离NTM,并以16S rRNA测序结果为对照。
结果3种方法均鉴定出相同细菌,但方法1的鉴定值高于其他2种方法。对生长于Middle brook 7H10琼脂平板的83株共10个种的NTM进行鉴定,与16S rRNA测序结果比较,所有菌株均能鉴定至属水平,67株(80.7%)鉴定至种,6株鉴定到复合群水平,鉴定值大于1.700的NTM占81.9%(68/83),且重复性好。培养后获得的菌落从前处理至鉴定完成仅需1.5 h。
结论MALDI-TOF MS可快速准确地鉴定临床和环境分离的NTM,在临床实验室常规鉴定方面有着较好的应用前景。(中华检验医学杂志,2013,36:610-614)