SH2-B在原发性肝癌中的表达及其分子机制研究

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目的

分析接头蛋白SH2-B在原发性肝癌中的表达,探讨其在肝癌癌变中的分子机制。

方法

用免疫组织化学SABC法检测SH2-B在27例肝炎、29例肝硬化、47例肝癌患者组织中的表达。免疫荧光筛选低表达SH2-B的肝癌细胞HepG2,设转染组(转染pcDNA3.1-SH2-B质粒)、空载体组(转染pcDNA3.1空白载体)和对照组(未转染)。Western blotting检测基因转染效率,MTT法分析细胞增殖情况,集落形成试验分析其对细胞集落形成的影响,流式细胞术分析细胞周期变化。

结果

SH2-B在肝癌患者组织中的表达阳性率为95.7%,明显高于肝硬化组的55.2%(χ2=18.64, P<0.01)和肝炎组的25.9%(χ2=40.01, P<0.01)。肝癌细胞HepG2转染pcDNA3.1-SH2-B质粒后可获得SH2-B有效表达;培养48 h后转染组肝癌HepG2细胞平均吸光度(A)值为1.12±0.19,明显高于空载体组的0.45±0.11(t=-31.55, P<0.01),提示SH2-B促进肝癌细胞增殖;转染组细胞集落数为166±14,明显高于空载体组的82±8(t=-20.33, P<0.01)和对照组的78±9(t=-19.64, P<0.01),提示SH2-B显著促进肝癌细胞HepG2细胞集落形成;转染组S期细胞比例为(45.7±5.8)%,明显高于空载体组的(19.4±4.7)%(t=-20.33, P<0.01)和对照组的(20.5±5.1)%(t=-34.69, P<0.01),提示SH2-B促进肝癌HepG2细胞周期演进。

结论

SH2-B在肝癌中高表达,可能通过促进人体内肝癌细胞的细胞周期演进、增殖及转化参与肝癌的癌变过程。

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