HPLC法测定尿白蛋白方法的建立和初步临床应用

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目的建立 HPLC 法测定尿白蛋白(Alb)的方法并做初步临床应用。方法采用Agilent 4.6 mm×250 mm、5μm的 C18反相柱,优化流动相并选择合适的检测波长,评价该法的各项性能指标;测定46例糖尿病患者尿 Alb。结果标准品和尿液 Mb 均在13.1 min 出峰,在1 820 mg/L范围内标准曲线的直线性非常好,r 值达到0.999 7,生物检测限为4.2 mg/L;24.5 mg/L 和546.9 mg/L 浓度时的批内和批间变异系数(CV)分别为3.36%、4.12%和1.93%、1.97%;回收率为96.3%、98.2%和97.5%。在46例糖尿病患者尿中,HPLC 法能检出25例(54.3%)的微量白蛋白尿,比免疫散射比浊法(12例,占26.1%)检出更多。结论 HPLC 法比免疫法能检出更多的微量白蛋白尿,在目前尚无方便可靠的方法测定尿总白蛋白前,HPLC 法可用于常规尿微量白蛋白的测定,也可用于有关糖尿病肾病等的科研用途。
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