【摘 要】
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3-(4-5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法是一种常规的检测细胞活性和药物毒性的方法,应用范围十分广泛,是在细胞水平的药物筛选研究中重要的检测手段之一.然而,这
【机 构】
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北京师范大学,资源学院,北京100875;北京师范大学,化学学院,放射性药物化学教育部重点实验室,北京100875
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3-(4-5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法是一种常规的检测细胞活性和药物毒性的方法,应用范围十分广泛,是在细胞水平的药物筛选研究中重要的检测手段之一.然而,这种检测方法由于化合物或测试条件的原因,可能给出不真实的筛选结果.例如,从天然植物中所提取多酚类化合物可以直接与MTT反应,即使在没有细胞的情况下,随着其浓度的增加,MTT的吸光度值也随之增加,因此不能真实地反映筛选结果.我们从绿茶中提取的15个多酚类化合物进行测定,表明MTT与多酚类化合物反应能力的大小与多酚类酚羟基的还原性有关.当三个或更多的酚羟基形成共轭的多酚时,其还原能力显著增加.同时常用的细胞培养基也能影响MTT的吸光度值,其影响顺序的大小为:α-MEM培养基+10%胎牛血清(FBS)＞α-MEM培养基>DMEM/F12＞PBS.而且我们还发现MTT法在570 nm处的吸收测定比在595 nm处更敏感.这些发现不仅有助于多酚类化合物的细胞水平活性研究,还将有助于MTT方法在药物筛选研究中的正确应用.
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