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穿刺活检（needling biopsy）又称针刺活检（puncture biopsy）。优点：方法简便，可在门诊于局部麻醉下进行，穿刺对组织的损伤小、出血少，因而较为安全、感染机会少，不影响早期化疗或放疗，常由一个人操作。近年来在 CT、MRI 超声及透视引导下针刺活检，提高了成功率。2000年 Saifuddin 用超声影像定位针刺活检准确率高达98.4％，如有必要可多次穿刺。缺点：取材量较少，经验不足或取材部位不当时未刺入瘤区取得有代表性的瘤组织，则难于得出准确结论，甚至做出错误结论。据国内报道，穿刺活检成功率为77.5％~97.0％。