煤泥是选煤厂洗选的尾矿，因储量巨大，具有水分、灰分高、热值低等特点，难以被处置，常被当作一种废弃物随意堆放，由此造成土地资源的浪费和环境的污染。为拓宽煤泥的利用途径，实现资源利用和环境保护，对煤泥厌氧发酵转化生物甲烷的影响因素进行分析。选取内蒙古锡林郭勒盟矿、山西燕子山矿和马兰矿、河南赵固一矿选煤厂的煤泥，以实验室驯化的菌液为菌种来源，通过生物产气模拟实验、红外光谱、荧光光谱、16S rRNA测试来分析不同煤泥产气差异的影响因素。结果表明：不同煤泥生物产气能力不同，产气受制于煤变质程度和有机质含量，煤阶越低且有机质含量越高，煤泥的产气效果越好，反之，则相反；低变质程度煤泥经微生物降解后，煤中脂肪结构、羟基、氨基等各类基团更易脱落，芳香类物质部分被转化为小分子量物质，与高变质程度煤泥相比更容易产气；低变质程度煤泥中的蛋白质类有机质被微生物分解较多，产气较好，而高变质程度煤泥含有较多不易降解的腐殖质类有机质，产气效果差。不同煤泥菌群组成差异性较小，细菌多样性高于古菌，细菌以假单胞菌、拟杆菌属为主，古菌以甲烷粒菌属、甲烷丝菌属为主。煤泥转化生物甲烷受细菌影响较大，优势细菌菌属对前期有机质降解起关键作用，生物甲烷主要来源于甲烷粒菌属对CO2和H2的转化利用。研究结果揭示了不同煤泥产气差异的原因，并为建立煤泥转化生物甲烷的潜力评价方法提供参考。