【摘 要】
：
利用CRISPR/cas9系统建立稳定敲除PKA C-α基因的INS-1细胞株,研究PKA C-α在胰岛β细胞中的功能。设计2个长25 bp且分别靶向PKA C-α基因的exon 5和exon 7的sgRNA,将其克隆
【机 构】
：
广东省新药筛选重点实验室南方医科大学药学院
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目(81603118);广州市“珠江新星”(201806010119);广东省大学生创新创业项目“攀登计划”(pdjh2017b0098)
论文部分内容阅读
利用CRISPR/cas9系统建立稳定敲除PKA C-α基因的INS-1细胞株,研究PKA C-α在胰岛β细胞中的功能。设计2个长25 bp且分别靶向PKA C-α基因的exon 5和exon 7的sgRNA,将其克隆至LentiCRISPRv2-sgRNA质粒并转染至293T细胞中制备sgRNA-Cas9慢病毒,慢病毒感染INS-1细胞,嘌呤霉素筛选出阳性细胞并采用有限稀释法筛选单克隆细胞,Western blotting印记法检测单克隆细胞中PKA C-α蛋白的表达水平,测序确认单克隆细胞中PKA C
其他文献
沂源县位于山东省淄博市南部,县内河流众多,地表水资源相对丰富,但可供饮用水资源缺乏,属水质性缺水。田庄水库位于沂河上游,是沂源县唯一的一座大型水库,随着工农业生产的迅
以成都平原周边的5条道路的边坡植被群落作为研究对象,采用样线法,研究坡度对道路边坡的植物群落多样性的影响。选取101个海拔在300～400 m间并且土壤质地相同的边坡样方进行坡
本文叙述从酒厂废弃的下脚料中分离出葡萄籽进行综合利用,先榨取营养丰富的葡萄籽油,然后从粕中提取原花青素和蛋白质,剩下的残渣可以制作活性碳或做饲料等,对于带皮发酵的还
产业化扶贫是近几年全国贫困地区正在实践的一种新型扶贫方式,是有效解决贫困农户稳定经济收入来源的重要途径。在阐述产业化扶贫基本内涵的基础上,对目前产业化扶贫中存在的
面对世界经济危机的冲击,面对世界经济出现复苏的迹象,如何正确认识并采取有效措施应对后经济危机时代给中国企业"走出去"带来的影响,防范风险,抓住机遇,是中国企业"走出去"
在潮州音乐中,偏音存在着诸如轻三六、轻三重六、重三六以及活三五等音阶形式下的升降游弋变化,表现为此宫系统之偏音可变化为彼宫系统之正音或相反之情况,故各音阶之间的转
近年来,网络的兴起成为整个经济领域乃至整个会计行业研究的热点问题。本文对网络会计的相关信息:包括网络会计的前景,影响,利弊等问题作了分析与建议。
本研究首先考察了合成的HZSM-5沸石分子筛对催化裂化反应的影响。其次考察了碱处理后的商用HZSM-5沸石分子筛对催化裂化反应的影响。最后在试验的基础上,优化工艺参数条件,并
１９９２年２月～１９９３年２月和１９９７年１月～１９９８年１月，用路线统计法对深圳福田红树林保护区陆鸟进行了两个周期调查．两期调查结果比较表明，该地区近期陆鸟减少２目５科４０种，其中国家保护鸟类６种，当地繁殖鸟类１３种；优势种和常
当前网络信息数据呈指数倍增长,各种信息数据不间断地进行多向传输,在信息传输、储存、处理和使用的的过程中,网络用户的信息保护占据着一个至关重要的地位。在对近期出台的