【摘 要】
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为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)的方法,根据GenBank上登录的PDCoV N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒pMD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方法的特异性及灵敏度.结果 显示,该方法与猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应,且最低检测量为5.1×101 copies/μL.进一步对本实验室2016年至2019年在河北保定收
【机 构】
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河北农业大学动物医学院,河北保定071001;河北农业大学动物医学院,河北保定071001;瑞普(保定)生物药业有限公司,河北保定071000
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为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)的方法,根据GenBank上登录的PDCoV N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒pMD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方法的特异性及灵敏度.结果 显示,该方法与猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应,且最低检测量为5.1×101 copies/μL.进一步对本实验室2016年至2019年在河北保定收集的95份临床样品进行检测,LAMP检测结果与普通RT-PCR检测结果的符合度高,检测时间为1h.结果 表明,本研究中建立的LAMP检测方法简便、特异、灵敏、快速,有望在PDCoV的临床检测中发挥重要作用.
其他文献
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Dear Editor,rnThe coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic presents a severe threat to public health and the global economy and the direct origin of the causative agent severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2)remains unresolved (WH
Dear Editor,rnThe genus Enterovirus (EV),belonging to the family Picornaviridae,order Picornavirales,comprises 15 spe-cies:Enterovirus A-L and rhinovirus A-C (Zell et al.2017).Enterovirus A (EV-A) has 25 serotypes,including several pathogens,such as EV-A7
目的:探究可乐定透皮贴片治疗儿童中重度抽动障碍的临床治疗效果.方法:资料选取2018年2月至2020年2月收治的80例中重度抽动障碍患儿作为本次的研究对象,采用随机数表法将其平均分为两组,对照组患儿给予常规药物治疗,观察组患者采取可乐定透贴片进行治疗,治疗8周后比较两组患儿的抽动改善率、运动功能改善情况以及不良反应发生率.结果:对两组中重度抽动障碍患儿实施不同治疗方案后,观察组抽动障碍患儿的抽动改善总有效率明显高于对照组患儿,分别为97.50％ 和85.00％,P<0.05;观察组抽动患儿的运动功能改善水
目的:分析椎管内麻醉不同给药方法对剖宫产术中产妇优良率、不良反应差异.方法:以2018年1月至2021年6月于本院行剖宫产分娩产妇300例为研究对象,取盲选抽签法分组后行对比性临床研究.以椎管内硬膜外麻醉者为参照组(n=150),以椎管内腰-硬联合麻醉者为研究组(n=150).分析产妇术中麻醉优良率、麻醉指标、术后镇痛效果、新生儿阿氏评分及不良反应发生率差异.结果:研究组术中麻醉优秀率(68.67％)、麻醉阻滞最高平面(8.23±0.51)均高于参照组,且研究组麻醉不良率(1.33％)、麻醉起效时间(4.
目的:评析对子宫腺肌瘤患者在医治过程中使用高强度聚焦超声治疗的治疗优势.方法:此研究选取2019年2月1日至2020年9月1日治疗的132例子宫腺肌瘤患者,随机分为对照组66例,使用传统手术治疗;另外观察组66例,采用高强度聚焦超声治疗.探究患者手术情况(包括术中情况和术后恢复效果)、手术安全及患者生活治疗变化情况.结果:手术后发现行高强度聚焦超声治疗的观察组生活质量从生理功能、躯体功能、情感职能、社会功能等方面的改善情况显著优于接受传统手术治疗的对照组且总生活质量加权评分更高(P0.05),但在手术后发
目的:分析药学干预对本院Ⅰ类手术切口预防性应用抗生素药物的影响.方法:选取本院2017年10月至2018年10月所收治的Ⅰ类手术切口患者82例进行相关研究,将其临床资料进行回顾性分析,并借助数字表法将其划分为两组,各41例.期间,参照组采取常规用药管理的方式,研究组则采取药学干预的方式,考量药学干预对Ⅰ类手术切口预防性应用抗生素药物的影响.结果:参照组患者的不良反应发生率为29.27％,研究组为4.88％,可见,研究组患者的不良反应发生率明显低于参照组,该差异具有统计学意义(P<0.05).结论:药学干预
为了解析非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)pO174L蛋白的功能,根据ASFV HLJ/18毒株基因序列(GenBank登录号:MK333180)设计引物,扩增O174L基因并克隆至pET-28a(+)载体中,构建原核表达载体pET-28a-O174L,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达后,通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白,利用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定重组蛋白表达产物的抗原性,用重组蛋白免疫新西兰大白兔制备
以阪崎克罗诺杆菌特异性基因16SrRNA和外膜蛋白基因ompA为靶序列,设计适用于重组酶聚合酶扩增-侧流层析技术(RPA-LF)的引物和探针,并优化反应条件.结果表明,RPA反应可在25～45℃进行,10～20 min即可完成.优化条件后,RPA-LF总反应时间仅为20 min,包括RPA在39℃反应15 min,RPA反应产物在LF试纸条上反应5 min,即可用肉眼判断结果.该方法具有较高的灵敏度,最低检测限可以达到80 pg/反应,约为960 CFU/反应.与7种常见的食源性病原菌都没有交叉反应,表明