【摘 要】
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目的体外扩增、克隆霍乱弧菌O1群和O139群1 149 bp的NhaA基因片段. 方法采用PCR方法扩增NhaA基因,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后用低熔点琼脂糖法回收纯化,插入pcDNA3载
【机 构】
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深圳市福田区卫生防疫站,中山医科大学微生物学教研室
【基金项目】
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广东省深圳市福田区科技三项费资助项目
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目的体外扩增、克隆霍乱弧菌O1群和O139群1 149 bp的NhaA基因片段. 方法采用PCR方法扩增NhaA基因,经限制性内切酶BamHI和EcoRI酶切后用低熔点琼脂糖法回收纯化,插入pcDNA3载体的多克隆位点,构建重组体,转化大肠杆菌,并对克隆基因进行酶切鉴定. 结果分别从霍乱弧菌O1群和O139群扩增出1 149 bp的NhaA基因片段,所构建的重组体经酶切分析和预期结果一致. 结论成功扩增并克隆我国散发霍乱O1群和O139群NhaA基因,为研究霍乱流行规律和基因疫苗提供了重要的实验依据.
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