PHA聚合酶基因phaC的克隆及其在酿酒酵母中的表达

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对聚羟基脂肪酸酯(PHA)聚合酶基因phaC进行克隆,并将其与穿梭质粒pYES2连接,构建了酿酒酵母表达质粒pYES2-phaC。测序验证后用LiAc/SSDNA/PEG方法将质粒转化至Saccharomyces cerevisiae INVSC1中,经SC—URA培养基筛选得到阳性转化子。由2%半乳糖培养基诱导表达后,提取细胞粗蛋白测定PHA聚合酶酶活力,结果表明,表达phaC基因的重组菌酶活力为2.45U/mg,证明phaC基因在S.cerevisiae INVSC1中得到表达。
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