冻融液的温度对人未成熟卵母细胞玻璃化冻融效果的影响

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目的探讨冻融液的操作温度对未成熟人卵母细胞(GV、MI)玻璃化冻融效果的影响。方法收集卵胞浆内单精子注射(ICSI)患者的GV、MI卵母细胞,根据冻融液操作温度的不同分为A、B、C组。冻融后存活及未冷冻对照组(D组)卵母细胞体外成熟(IVM)培养,成熟的MII卵母细胞固定后进行免疫荧光染色,然后用Nikon CISI激光扫描共聚焦显微镜观察纺锤体、染色体形态。结果实验组GA、GB、GC卵母细胞冻融后的存活率和体外成熟率分别为100%、81.3%、68.8%和33.3%、83.3%、72.7%,仅GC组的存活率与对照比较存在显著性的差异(P<0.05);实验组中只有GB组获得了纺锤体(20%)和染色体(10%)形态正常卵母细胞。实验组MA、MB、MC卵母细胞冻融后的存活率分别为71.4%、100%、83.3%,各实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05);MA组体外成熟率与对照组比较存在极显著性的差异(0%比57.1%,P<0.01),MB、MC与对照组的体外成熟率比较无显著性的差异(66.7%、80%比57.1%,P>0.05);仅MC获得1个正常纺锤体和染色体形态卵子。结论冻融液的合适操作温度可以提高未成熟卵子的冻融效果。
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