【摘 要】
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目的研究反义人类端粒酶 RNA逆转录病毒载体对结直肠癌 HT29细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用,探讨以端粒酶为靶点的结直肠癌基因治疗的可能性.方法将端粒酶 hTR的 cDNA反向插入逆转录病毒载体 pLXRN中,转染包装细胞 PT67后获得反义重组病毒,感染结直肠癌 HT29细胞.采用 RT PCR检测 hTR表达,端粒酶重复扩增法( telomerase repeat amplificati
【机 构】
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100034,北京大学第一医院外科,河北医科大学第三医院,河北医科大学第二医院
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目的研究反义人类端粒酶 RNA逆转录病毒载体对结直肠癌 HT29细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用,探讨以端粒酶为靶点的结直肠癌基因治疗的可能性.方法将端粒酶 hTR的 cDNA反向插入逆转录病毒载体 pLXRN中,转染包装细胞 PT67后获得反义重组病毒,感染结直肠癌 HT29细胞.采用 RT PCR检测 hTR表达,端粒酶重复扩增法( telomerase repeat amplification protocol, TRAP)检测端粒酶活性,绘制生长曲线了解细胞生长状态,倒置显微镜观察和 DNA 片段电泳检测细胞凋亡.结果反义 hTR作用后的结直肠癌细胞 hTR表达下降,端粒酶活性和细胞生长受到明显抑制,细胞出现凋亡.结论反义 hTR对结直肠癌 HT29细胞的生长和端粒酶活性具有明显的抑制作用,有可能以 hTR为靶点对结直肠癌进行基因治疗.
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