【摘 要】
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目的:建立一种检测人血清和脑脊液中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体的方法。方法:以大鼠小脑和海马基质作为初筛方法。建立过表达胶质纤维酸性蛋白的HEK-293T细胞模型。间接免疫
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院神经内科; 广州医科大学附属第二医院神经研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81771302);广东省科技计划项目(2015A030302093,2014A020212332)
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目的:建立一种检测人血清和脑脊液中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体的方法。方法:以大鼠小脑和海马基质作为初筛方法。建立过表达胶质纤维酸性蛋白的HEK-293T细胞模型。间接免疫荧光检测来自520例患者配对的血清与脑脊液样本。结果:大鼠小脑、海马基质检测结果显示,共有22份脑脊液样本和2份血清样本中有IgG结合于软脑膜、脑膜下,呈线性荧光模式。IgG亦结合于脑实质各层胶质细胞,终突包绕在微血管的周围,尤其在小脑分子层表现为Bergmann状放射状。荧光双标技术显示IgG结合位置与GFAP表达的位置完全一致。表达GFAPα,ε的HEK-293T细胞模型检测结果显示22例初筛阳性的脑脊液标本中,21例(95.4%)可被转染细胞检测出GFAPα或ε抗体阳性,其中16例(76.2%)GFAP-α和GFAP-ε抗体双阳性,5例(23.8%)纯GFAP-ε抗体阳性。2例初筛阳性的血清样本均为GFAP-α和GFAP-ε抗体双阳性。结论:基于脑组织和转染细胞的方法能成功检测患者GFAP抗体,有助于GFAP星形细胞病的诊治。
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