目的:检索中国期刊全文数据库2005/2008相关文献显示,RNA干扰研究中,转染效率的高低直接决定siRNA的表达效果,目前关于应用小分子干扰RNA对人羊膜WISH细胞转染效率的检测研究少见。实验应用化学合成siRNA转染人羊膜WISH细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,并初步检测转染对细胞凋亡的影响。方法:实验于2007-03/12在广州医学院试验医学研究中心完成。①实验材料:实验中应用的人羊膜WISH细胞株购于中国科学院上海生命科学研究所。②实验方法:应用0,5,10,20,30nmol/L化学合成的CY3-Negative siRNA转染人羊膜WISH细胞,转染后24h应用荧光显微镜和流式细胞仪定性、定量评估其转染效率;20nmol/L CY3-Negative-siRNA转染细胞24h后,应用Annexin V-EGFP试剂盒检测细胞早期凋亡情况。结果:荧光显微镜显示,5,10,20,30nmol/L CY3-Negative siRNA转染细胞内均可见红色荧光,对照组无荧光信号。20,30nmol/L CY3-Negative siRNA的转染效率明显高于5,10nmol/L组(P<0.05);20nmol/L和30nmol/L siRNA组转染效率差异不显著(P>0.05)。检测20nmol/L Negative siRNA转染细胞24h后的细胞早期凋亡情况,转染组与对照组细胞早期凋亡率分别为1.96%和2.36%,两组之间细胞早期凋亡率差异不显著。结论:①化学合成的siRNA可以成功转染人羊膜WISH细胞,转染后对细胞的早期凋亡率无影响。②20nmol/L的siRNA即可获得理想的转染效果。