论文部分内容阅读
根据视黄醇结合蛋白（RBP）晶体结构和计算机模拟对拟突变位点所作出的结构预测，筛选出2个可能对RBP结合能力有影响的氨基酸位点。利用定点突变技术分别将35位亮氨酸突变为能引入较大构象变化的甘氨酸，将98位谷氨酰胺突变为亲水、带正电的精氨酸。将突变后的RBP基因转入表达宿主菌获得表达后，对突变体蛋白实现了变性条件下的分离纯化。复性后与视黄醇的荧光增强饱和滴定试验表明，35位突变为甘氨酸后对RBP结合能力没有产生明显的影响，但98位突变为精氨酸后，则显著的提高了与视黄醇的结合能力，说明98位是影响RBP与视黄