小鼠MME基因真核表达载体的构建与鉴定

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wlm7411814
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目的克隆小鼠巨噬细胞金属弹力酶(MME)基因结构域Ⅰ和Ⅱ,构建真核细胞表达载体,用于动物肿瘤原位种植模型的研究。方法通过PCR选择性扩增MME基因结构域Ⅰ和Ⅱ,克隆人pGEM-T载体中,限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并进行双酶切及PCR鉴定。结果以MME cDNA为模板进行PCR扩增的特异性片段在750bp和1000bp之间。以此构建的pGEM-T-MME克隆载体和表达载体,经限制性内切酶酶切证实载体中带有MME目的基因片段;与小鼠MME cD
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