成熟志贺毒素全长与截短A亚单位在E.coli中的表达及纯化

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应用PCR技术从Ⅰ型痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae type Ⅰ)中,扩增出约895 bp的成熟ShT-A基因片段,克隆至pGEM-T载体申,经蓝白斑筛选、PCR和双酶切鉴定正确后,命名为pGEM-TA2.测序结果表明,ShT-A与GenBank中ShT-A序列完全一致.用BamHⅠ和Kpn Ⅰ双酶切克隆质粒,得到为895 bp成熟ShT-A与pQE30原核重组表达载体连接,构建原核重组表达质粒.经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳观察,没有目的蛋白表达.DNAsis软件分析ShT-
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