恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化和鉴定

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:harrietgu
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目的在大肠埃希菌(E.coli)中尝试非融合蛋白技术可溶性表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH),以获得具有相对完整空间表位的重组非融合GDH.方法将恶性疟原虫GDH基因克隆到pET-23(a)表达载体中,转化E.coli BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,菌体反复冻融后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物的存在形式,可溶性表达产物经Source-Q及Source-S层析纯化并用SDS-PAGE分析纯度.通过蛋白质印迹试验鉴定表达和纯化产物的免疫学活性.
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