【摘 要】
:
【目的】Luciferase2/mKate2双报告基因标记小鼠骨髓间充质干细胞(mMSC),并进行活体生物发光和荧光双模态光学成像研究。【方法】全骨髓细胞贴壁分离法提取mMSC,进行细胞表面
【机 构】
:
中山大学附属第三医院放射科分子影像学实验室,中山大学介入放射学研究所
【基金项目】
:
NSFC-广东联合基金(U1032002);国家自然科学基金(81071206,81271621,81271562);国家自然科学基金青年基金(81101097,81101096);2010-2012卫生部临床学科重点项目(No.164)
论文部分内容阅读
【目的】Luciferase2/mKate2双报告基因标记小鼠骨髓间充质干细胞(mMSC),并进行活体生物发光和荧光双模态光学成像研究。【方法】全骨髓细胞贴壁分离法提取mMSC,进行细胞表面标志物和多向分化潜能的鉴定;CMVLuciferase2-mKate2慢病毒感染mMSC,根据细胞内远红荧光蛋白mKate2的表达水平评估转染效率并利用流式细胞仪进行纯化筛选;对筛选后的mMSC(mMSC-CMV-Luc2-mKate2,mKate2+>95%)进行活体生物发光和荧光双模态光学成像。【结果】成功分离mMSC;表型分析结果显示mMSC高表达Sca-1(94.5%)、CD44(99.6%),低表达CD11b(0.092%)、CD45(0.11%);mMSC具有成脂和成骨分化能力。CMV-Luciferase2-mKate2慢病毒感染mMSC 96 h后,细胞内mKate2的荧光表达率为22.97%,经流式细胞仪筛选后mKate2表达率大于95%。对筛选后的mMSC进行活体生物发光成像和荧光成像可探测光信号,光信号强度与细胞数量呈明显线性正相关(生物发光成像为R2=0.9893;荧光成像为R2=0.9226)。【结论】CMVLuciferase2-mKate2慢病毒转染mMSC可稳定表达双报告基因Luciferase2和mKate2,体外可根据细胞内mKate2的表达水平间接评估转染效率、进行细胞筛选,活体内可同时进行生物发光成像和荧光成像,为mMSC体内移植后生物学行为的研究提供了良好、无创的定量示踪手段。
其他文献
编辑校对人才已成为重要的出版人才资源,各传统出版社、互联网出版单位、文化传媒企业对编辑校对人才的需求量与日俱增。为了满足出版单位对高职层次编辑校对人才的需求,本文结
形成性评价具有许多传统评价方式无可比拟的优势。而反馈,作为形成性评价模式中关键的一环,对整个评价的实施效能起决定作用。本文从反馈这一形成性评价中的关键环节入手,探讨了
文章介绍了借鉴消除不同学科之间壁垒,促进学科相互交融,有机地将学科与学科之间理论与实践相互结合运用的理念,充分挖掘医学视听教材多元价值因素的教育功能,以优良的专业素
广西容县保留有相当数量的民国将军故居,这些故居不仅是弥足珍贵的人文资源,而且也是很有价值的旅游资源。近年来,民国将军故居的保护与开发工作虽然有所加强,但其形势却不容
郭茂倩《乐府诗集》作为乐府文学研究史上重要的文献资料,其中对乐府诗的收集和评注,都对后世的乐府研究具有颇为深远的影响。本文将以《乐府诗集·有所思》古题及其后世拟作
在中学数学教学中,笔者发现学生在学习数学时,对其概念、理论、方法等,并不是无动于衷,而是常常抱有不同的态度,会有各种复杂的内心体验。如果顺利完成学习任务,会感到满意、愉悦和
近年来,如何构建和谐医患关系已成为各级医疗机构关注的焦点,也是社会关注的热点问题。本文就患者或家属、医务人员及社会公众等不同人群对构建和谐医患关系的认识进行了调研
介绍信息化考勤系统组成结构和功能,分析了信息化考勤系统在企业中的应用和管理特点,总结了系统实施后的作用和存在的问题,提出了一些改进思考和建议。
近几年,中国创业风险资本总额始终徘徊不前,资本总量和投资机构规模小,远远不能满足创业风险投资的需要。应构建保障系统,引导社会资本参与创业风险投资。这个保障系统框架包
随着中医药国际化的不断深入,中医药教育的规范化问题也凸现出来。中医院校统编教材实际上在教学和临床中发挥着标准的作用。本文基于16本当前全国高等中医院校广泛使用的《