【摘 要】
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目的 建立稳定的呼吸道合胞病毒(RSV)感染滴度测定的实时荧光定量PCR(Realtime Quantitative PCR,Q-PCR)检测方法和酶免疫斑点法(Enzyme Immunospots,EIS),并与半数定量方法(
【机 构】
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安徽医科大学免疫学教研室,合肥,230032北京交通大学生命科学与生物工程研究院;
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目的 建立稳定的呼吸道合胞病毒(RSV)感染滴度测定的实时荧光定量PCR(Realtime Quantitative PCR,Q-PCR)检测方法和酶免疫斑点法(Enzyme Immunospots,EIS),并与半数定量方法(50% tissue culture infectious doses,TCID_(50))进行比较.方法 分别采用Q-PCR、EIS和TCID_(50)分析RSV感染的细胞和RSV攻毒后小鼠肺脏标本中的病毒滴度.结果 RSV感染细胞的上清中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为:Q-PCR和EIS(pfu)的比约为10:1,EIS(pfu)和TCID_(50)(TCID_(50) 换算成pfu)比约为10:1;RSV攻毒后小鼠肺脏标本中,三种分析方法检测的病毒滴度值之比为,QPCR和EIS(pfu)比约为1000:1,EIS(pfu)和TCID50(TCID50换算成pfu)比约为5:1.结论 成功建立了RSV感染滴度测定的Q-PCR和EIS分析方法,通过与TCID_(50)方法的比较分析,我们认为EIS法分析RSV滴度具有成本低和较高的灵敏度,有较好的应用前景.
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