【摘 要】
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目的 探究青藤碱通过调节Nrf2通路对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响.方法 建立缺氧复氧损伤细胞模型,CCK-8法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶试剂盒检测LDH水平;肌酸激酶同工酶测试盒检测CK-MB水平;肌钙蛋白测定测试盒检测cTnⅠ水平;DCFH-DA探针检测ROS含量;总超氧化物歧化酶测定试剂盒检测SOD含量;测定试剂盒检测MDA含量;过氧化氢酶测定试剂盒检测CAT含量;谷胱甘肽过氧化物酶测试盒检测GSH-Px含量.ELISA检测TNF-α、IL-6和IL-1β水平;Hoechst染色检测细胞凋亡率;Wes
【机 构】
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唐山弘慈医院 河北省唐山市, 063000
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目的 探究青藤碱通过调节Nrf2通路对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响.方法 建立缺氧复氧损伤细胞模型,CCK-8法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶试剂盒检测LDH水平;肌酸激酶同工酶测试盒检测CK-MB水平;肌钙蛋白测定测试盒检测cTnⅠ水平;DCFH-DA探针检测ROS含量;总超氧化物歧化酶测定试剂盒检测SOD含量;测定试剂盒检测MDA含量;过氧化氢酶测定试剂盒检测CAT含量;谷胱甘肽过氧化物酶测试盒检测GSH-Px含量.ELISA检测TNF-α、IL-6和IL-1β水平;Hoechst染色检测细胞凋亡率;Western印迹检测Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、Keap1、Nrf2、p-Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平;利用siRNA敲减Nrf2低表达Nrf2后再次检测上述指标变化.结果 与OGD/R组比较,各剂量组细胞存活率降低,LDH、CK-MB、cTnⅠ水平降低,ROS、MDA含量降低,SOD、CAT和GSH-Px含量升高,TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、Keap1蛋白水平降低,p-Nrf2/Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平升高.通过siRNA敲减Nrf2低表达Nrf2后,氧化应激,炎性反应和相关蛋白表达被逆转.结论 青藤碱通过调节Nrf2通路保护心肌细胞免受缺氧复氧损伤.
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