【摘 要】
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通过基于Byetta结构的促胰岛素分泌肽类似物的PEG修饰和筛选,以期获得一种长效促胰岛素分泌肽修饰物。利用化学合成的方法获得C末端突变成半胱氨酸的Byetta类似物(Ex4C),再用
【机 构】
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重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆富进生物医药有限公司,
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通过基于Byetta结构的促胰岛素分泌肽类似物的PEG修饰和筛选,以期获得一种长效促胰岛素分泌肽修饰物。利用化学合成的方法获得C末端突变成半胱氨酸的Byetta类似物(Ex4C),再用不同分子质量大小的马来酰亚胺活化的mPEG(MAL-mPEG)对其半胱氨酸的游离巯基进行定点修饰,修饰后产物用阴离子交换色谱和反相色谱进行纯化。通过测定其体外刺激RINm5F细胞释放cAMP的水平,以及体内对STZ模型小鼠的降血糖作用来评价其生物活性。MAL-mPEG化的促胰岛素分泌肽的SDS-PAGE及RP-HPLC纯度均达98%以上,且修饰位点专一;促胰岛素分泌肽经5 k、20 k、35 k分子质量大小的mPEG修饰后体外刺激RINm5F细胞释放cAMP的ED50分别为1.61 ng/mL、15.68 ng/mL、32.95 ng/mL;3种修饰物在相同剂量(40μg/kg)皮下给药对正常小鼠和STZ模型小鼠体内均有明显的降血糖作用,维持降血糖时间分别达24 h、48 h和72 h。
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