中国美利奴细毛羊BAC文库的三维PCR筛选

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：renminjie

【摘要】

：

本研究利用中国美利奴细毛羊全基因组BAC丈库，构建了可供快速筛选的两级水平的混合池，一级混合池和二级混合池（Primarv pools and secondary pools）。一级混合池基于每一384-well

【作者】

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吴新东陈芳李鑫邹毅辉邱巍高剑峰

【机构】

：

石河子大学生命科学学院

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2008年10期

【关键词】

：

混合池三维筛选 BAC丈库绵羊 pools three-dimensional screening BAC library sheep

【基金项目】

：

科技部基金（No.2006DFB33750）资助.

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本研究利用中国美利奴细毛羊全基因组BAC丈库，构建了可供快速筛选的两级水平的混合池，一级混合池和二级混合池（Primarv pools and secondary pools）。一级混合池基于每一384-well盘而构建，由盘、行、列三维混合池组成，二级混合池基于整个BAC文库而构建。设计了一种基于PCR技术的快速筛选方法，先筛选二级混合池，再根据结果筛选相应的一级混合池。利用此方法只需一步共66个PCR反应即可从BAC丈库中7．4万个克隆中筛选出1个阳性克隆，或三步100个以内的PCR反应筛选出多个阳性

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