益气调髓方通过骨髓间充质干细胞CD56+来源的外泌体调控软骨细胞活性的机制研究

来源 :中华骨与关节外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bird2000
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目的:探究益气调髓方(简称“YQTS”)是否通过骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)CD56+来源外泌体调控软骨细胞活性。方法:YQTS给药组和空白给药组大鼠分别灌胃给予YQTS和生理盐水后提取BM-MSCs,流式细胞术、细胞免疫荧光染色分析两组给药后CD56+BM-MSCs的变化;流式细胞术分选CD56+BM-MSCs,并用Transwell小室共培养的方法探究YQTS处理的CD56+BM-MSCs对BM-MSCs软骨分化的影响;提取CD56+BM-MSCs来源的外泌体,考察其对BM-MSCs软骨分化的影响;CCK-8法检测细胞增殖,甲苯胺蓝法检测软骨分化程度,qRT-PCR和western blot检测Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。结果:与空白给药组比较,YQTS给药组BM-MSCs中CD56标记的细胞亚型增加,CD56表达增加(P=0.001);YQTS给药组的CD56+BM-MSCs能有效提高BM-MSCs的成软骨分化能力(P=0.009)。YQTS给药组的软骨细胞增殖率高于空白给药组(P=0.012),并提高Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。与未加入外泌体的PBS对照组相比,加入YQTS给药组的CD56+BM-MSCs外泌体处理的BM-MSC软骨分化程度更高(P<0.001),增加Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达。结论:YQTS通过CD56+BM-MSCs来源外泌体的细胞间通讯,增加BM-MSCs中CD56+细胞亚型占比,并促进BM-MSCs的软骨分化。
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