【摘 要】
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目的 分析肿瘤抑制基因Ras相关区域家族1A(RASSF1A)表达对鼻咽癌顺铂耐药的影响以及调控的分子机制.方法 首先利用免疫印迹法检测RASSF1A蛋白表达;利用慢病毒转染法在低表达R
【机 构】
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广州医科大学附属肿瘤医院放疗科,广州,510060华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科,武汉,430030;
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目的 分析肿瘤抑制基因Ras相关区域家族1A(RASSF1A)表达对鼻咽癌顺铂耐药的影响以及调控的分子机制.方法 首先利用免疫印迹法检测RASSF1A蛋白表达;利用慢病毒转染法在低表达RASSF1A的S18细胞中过表达RASSF1A,观察转染细胞在不同顺铂浓度处理下细胞的存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,最后通过免疫印迹法检测JNK通路核心激酶磷酸化水平.结果 相对于顺铂敏感的S26细胞,耐受顺铂的S18细胞RASSF1A蛋白表达水平低.与对照组细胞相比,在S18细胞中过表达 RASSF1A明显降低细胞在顺铂处理后的存活率[2 μmol/L 顺铂,(77.2 ± 6.1)% vs.(89.9 ± 3.2)%,P=0.03;4 μmol/L顺铂,(60.3 ± 3.2)% vs.(80.2 ± 6.7)%,P=0.02].过表达RASSF1A的S18细胞凋亡显著增加[(32.4 ± 7.2)% vs.(17.8 ± 4.9)%,P=0.04].机制分析证明过表达RASSF1A在鼻咽癌细胞中增加JNK磷酸化水平.结论 过表达RASSF1A逆转鼻咽癌细胞S18对顺铂的抵抗,机制研究提示RASSF1A通过激活JNK/SAPK通路增加顺铂诱导的细胞凋亡,抑制细胞存活.
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