【摘 要】
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目的 探讨miR-29a-3p通过靶向Bak1参与调控高糖诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。方法 体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为正常葡萄糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+miR-29a-3p模拟物组(HG+miR-29a-3p mimics)、高糖+模拟物阴性对照组(HG+NC mimics)。qRT-PCR检测miR-29a-3p的表达,流式细胞术检测细胞凋亡水平。蛋白印迹法检测凋亡相关因子B
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目的 探讨miR-29a-3p通过靶向Bak1参与调控高糖诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。方法 体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为正常葡萄糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+miR-29a-3p模拟物组(HG+miR-29a-3p mimics)、高糖+模拟物阴性对照组(HG+NC mimics)。qRT-PCR检测miR-29a-3p的表达,流式细胞术检测细胞凋亡水平。蛋白印迹法检测凋亡相关因子Bcl-2、Mcl-1、Bax、Caspase-3和Bak1的表达水平。双荧光素酶报告基因试验检测miR-29a-3p和Bak1的靶向关系。结果 与NG组比较,HG组miR-29a-3p表达水平降低,心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与HG+NC mimics比较,HG+miR-29a-3p mimics组心肌细胞凋亡水平明显降低(P<0.05),心肌细胞凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Bak1的表达显著降低(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达明显增加(P<0.05)。双荧光素酶报告基因技术验证了Bak1是miR-29a-3p的直接靶基因。结论 高糖能够诱导心肌细胞凋亡,过表达miR-29a-3p可能通过靶向调控Bak1减轻高糖诱导的心肌细胞凋亡。
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