【摘 要】
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目的:探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对高糖诱导足细胞损伤的影响及作用机制. 方法:将MPC-5细胞(小鼠永生系足细胞)分为6组:正常对照组(NG)、甘露醇渗透压对照组(NG+M)、
【机 构】
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三峡大学第一临床医学院 宜昌,443003三峡大学第一临床医学院 宜昌,443003;宜昌市中心人民医院肾内科;
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目的:探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对高糖诱导足细胞损伤的影响及作用机制. 方法:将MPC-5细胞(小鼠永生系足细胞)分为6组:正常对照组(NG)、甘露醇渗透压对照组(NG+M)、高糖组(HG)、高糖+1,25(OH)2D3干预组(HG+VD)、高糖+1,25(OH)2D3+3-甲基腺嘌呤干预组(HG+VD+3-MA)、高糖+1,25(OH)2 D3 +PI3K抑制剂LY294002组(HG+VD+ LY294002).采用CCK-8法分析细胞存活率;通过细胞免疫荧光技术观察自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达;Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin-1、P62,通路相关蛋白PI3K、Akt,抗凋亡蛋白Bcl-2及凋亡蛋白Bax和caspase-3的表达. 结果:(1)高糖可诱导足细胞凋亡,活性维生素D3可减少高糖诱导的足细胞凋亡;(2)活性维生素D3可逆转高糖诱导的足细胞自噬的下调,自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)可阻断活性维生素D3对高糖诱导的足细胞的损伤的保护作用;(3)活性维生素D3激活PI3K/Akt信号,LY294002阻断了对足细胞的保护作用及上调自噬的作用. 结论:活性维生素D3可通过PI3K/Akt信号通路调控自噬,减轻高糖诱导的足细胞凋亡和损伤.
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