【摘 要】
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从人胎盘组织中提取总DNA,经PCR扩增编码人β神经生长因子（β-NGF）成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pET15b中.重组质粒pET15b-NGF经测序与报道的完全一致.重组质粒转化大
【基金项目】
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天津市自然科学基金资助项目（033605211）
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从人胎盘组织中提取总DNA,经PCR扩增编码人β神经生长因子（β-NGF）成熟肽的基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pET15b中.重组质粒pET15b-NGF经测序与报道的完全一致.重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,经IPTG诱导表达得到16kDa的目的蛋白带,与预期的大小一致,NGF表达量约占全菌总蛋白的25%.经过亲和层析柱（Ni^2＋-charged IDA his-bind column）纯化后得到了单一的NGF蛋白条带,蛋白纯度可达90%以上,从每升表达菌液中可以得到4.56mgN
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