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目的:构建携带 Human Hsa-mir-133b 基因的 miRNA 干扰慢病毒载体(plKD-Ubc-eGFP-U6-shRNA),并成功转染食管癌 Eca109细胞株。为研究微小 RNA133b(miR-133b)对食管癌 Eca109细胞的作用奠定基础。方法凭据 Human Hsa-miR-133b基因的转录目录,设计 shRNA的靶点并进行引物的合成。将单链的引物退火成带粘性末端的双链片段,将其衔接于双酶切的 RNA干扰载体,替换原有的 ccdB毒性基因,用重组的质粒转染感受态细胞,并测定序列