【摘 要】
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目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性.方法:以DMSO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000 μg/mL)的矮壮素染毒小鼠胚胎
【机 构】
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北京大学公共卫生学院,食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室,北京 100191北京市海淀区卫生局卫生监督所,北京100037;北京大学公共卫生学院,食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室,北京
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目的:利用胚胎干细胞试验模型评价矮壮素的发育毒性.方法:以DMSO为阴性对照,使用不同剂量(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000 μg/mL)的矮壮素染毒小鼠胚胎干细胞D3(ES-D3)和3T3成纤维细胞,观察矮壮素对ES-D3细胞向心肌细胞分化的影响,以及对ES-D3和3T3细胞的细胞毒性,在此基础上,根据发育毒性判别公式对矮壮素致畸性进行判定.提取ES-D3分化抑制试验中的拟胚体总RNA,进行real-time PCR,在基因水平检测矮壮素对ES-D3向各胚层分化的影响.结果:1000μg/mL矮壮素染毒可明显促进体外培养ES-D3、3T3细胞增殖;250 μg/mL的矮壮素作用下,观察到具有心肌细胞收缩的拟胚体数仅占接种拟胚体总数的69.4％;1 000 μg/mL矮壮素能够影响ES-D3向心肌细胞分化的基因标志物(Nkx2.5,α-MHC)的表达.结论:无法利用判别公式对矮壮素进行发育毒性评价;矮壮素在不引起3T3、ES-D3细胞毒性的水平下,影响ES-D3向心肌细胞的分化,有产生胚胎毒性的可能.
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