正痘病毒检测基因芯片的研制

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目的研制正痘病毒的检测基因芯片,以应用于此类病毒引起疾病的早期诊断.方法运用长片段PCR方法从痘苗病毒中扩增30 kb的正痘病毒保守区域,PCR产物经Sau 3AI限制性内切酶消化后与T载体连接,筛选阳性克隆,扩增探针,用Cartesian Pixsys 5500打印仪制备成芯片.采用限制性显示技术对痘苗病毒和牛痘病毒样品进行标记,与芯片杂交,用Agilent扫描仪扫描,检测杂交信号.结果大小分别为10 035 bp,9 845 bp,9 293 bp的正痘病毒保守区被扩增出来,构建了其酶切片段克隆的探针
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