【摘 要】
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目的 动态观察四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝损伤过程中库普弗细胞膜上脂多糖(LPS)受体CDl4表达变化及其在细胞因子分泌中的作用。方法以CCl4皮下注射诱导大鼠肝损伤。采用联合酶灌注消化、不连续密度梯度离心法分离不同时期大鼠肝脏库普弗细胞。将库普弗细胞与不同浓度内毒素孵育6h,收集培养上清并抽提细胞RNA。ELISA检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。RT—PCR法检测库普弗细胞C
【机 构】
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上海第二医科大学附属仁济医院消化内科上海市消化疾病研究所,200001,上海第二医科大学附属仁济医院消化内科上海市消化疾病研究所,200001,上海第二医科大学附属仁济医院消化内科上海市消化疾病研究所
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目的 动态观察四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝损伤过程中库普弗细胞膜上脂多糖(LPS)受体CDl4表达变化及其在细胞因子分泌中的作用。方法以CCl4皮下注射诱导大鼠肝损伤。采用联合酶灌注消化、不连续密度梯度离心法分离不同时期大鼠肝脏库普弗细胞。将库普弗细胞与不同浓度内毒素孵育6h,收集培养上清并抽提细胞RNA。ELISA检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。RT—PCR法检测库普弗细胞CDl4 mRNA表达。偶氮基质显色法测定大鼠血浆内毒素水平。结果经CCl4处理4周和6周,大鼠库普弗细胞在体外培养时TNF-α基础分泌量明显高于正常大鼠(P<0.05)。在LPS刺激下,CCl4处理2、4和6周库普弗细胞的TNF—α分泌水平明显增加(P<0.05),呈浓度依赖方式。CCl4组大鼠库普弗细胞CDl4 mRNA表达从2周开始增加,6周时最明显,8周时恢复至正常水平。大鼠外周血内毒素浓度在肝损伤过程中升高。结论在CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤早期过程中,库普弗细胞内毒素受体CDl4表达上调,对内毒素敏感性增加。库普弗细胞是肝脏早期炎症反应中的一个重要效应细胞。
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