【摘 要】
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目的构建人源化的单链可变区抗体库,运用体外表达技术翻译并筛选特异性的抗NH-LBP抗体.方法分离健康人外周血单核细胞,抽提总RNA设计引物,扩增抗体轻重链的可变区,通过一段柔
【机 构】
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第三军医大学西南医院病理学研究所,第三军医大学西南医院国际合作实验室
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目的构建人源化的单链可变区抗体库,运用体外表达技术翻译并筛选特异性的抗NH-LBP抗体.方法分离健康人外周血单核细胞,抽提总RNA设计引物,扩增抗体轻重链的可变区,通过一段柔性片段将其连接成单链抗体库;应用体外表达技术翻译抗体库,并筛选出与NH-LBP高度结合的单链抗体片段.结果扩增的单链抗体可变区片段分别为340 bp和325 bp,经连接后约为750 bp.经过体外表达得到了约27 000的抗体片段,经过5轮筛选进化,得到了可与NH-LBP高度结合的抗体.结论已成功构建了人源化的单链抗体库;通过体外表
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