脂肪基质干细胞培养及其定向分化为成骨细胞、软骨细胞特性的研究

来源 :中华骨科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niechunming521
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目的 研究脂肪基质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分离培养的方法,探讨大鼠ADSCs在体外向成骨细胞、软骨细胞分化的能力.方法 从成年SD大鼠腹股沟处无菌获取脂肪组织,胶原酶消化分离,培养出ADSCs.基础培养基传至第二代时改换诱导培养基,分别诱导向成骨、软骨细胞分化,培养2~4周,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Von kossa染色鉴定向成骨细胞分化能力;阿新蓝染色鉴定向软骨细胞分化能力.RT-PCR检测成骨细胞、软骨细胞标志基因.结果 大鼠脂肪能够分离培养出生长旺盛的ADSCs;向成骨细胞诱导,ALP、Von kossa染色阳性,RT-PCR检测有ALP、Osteocalcin及Osteopontin表达;向软骨细胞诱导,阿新蓝染色阳性,RT-PCR检测有Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原和Aggrecan表达.结论 大鼠脂肪组织可以分离培养出ADSCs,生物学特性与骨髓基质干细胞(mesenchvmal stem cells,MSCs)相似,能够向成骨细胞、软骨细胞分化,有希望成为组织工程理想的种子细胞来源。

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