人血小板生成因子(TPO)的cDNA克隆及促血小板生成效应

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用RT-PCR方法,从人胎肝总RNA中扩增得到约1.1kb人TPOcDNA编码顺序,并进行分子克隆.将其中一个克隆(pTPO47)亚克隆到M13载体,测定全部DNA顺序.它的碱基顺序与已报道的顺序完全相同,有一个1059bP的开放阅读框架可编码353个氨基酸.pTPO47亚克隆到哺乳动物表达载体pCEP4,在哺乳动物293细胞系瞬时表达后,进行Northern杂交,结果显示有约1.4kb的转录产物.瞬时表达培养液腹腔注射小鼠后,可提高血小板计数42.3%.血小板生成因子的克隆对进一步研究血小板生成调节以及该因子作用的分子机理具有重要意义.
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