【摘 要】
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试验旨在探究自噬相关基因Atg12（autophagy-related 12 gene）在中华蜜蜂（中蜂）、意大利蜜蜂（意蜂）中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因
【基金项目】
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国家农业产业技术体系(nycytx-45);中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2018-IAR);国家自然科学基金项目(31372384)
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试验旨在探究自噬相关基因Atg12（autophagy-related 12 gene）在中华蜜蜂（中蜂）、意大利蜜蜂（意蜂）中的表达差异,为探讨中蜂抗螨分子机理提供参考。参照GenBank中东方蜜蜂Atg12基因序列（登录号:XM017048509.1）设计引物,扩增中、意蜂头部组织Atg12基因,并对其进行克隆、测序、原核表达及其氨基酸序列和蛋白结构分析,同时采用实时荧光定量PCR技术分析该基因在中、意蜂头部组织中的表达差异。结果显示,本试验成功扩增出大小为450 bp的目的片段,并表达出大小约42 ku重组蛋白;遗传进化树分析表明,在Atg12基因进化过程中,中蜂（Apis cerana cerana）、意蜂（Apis mellifera）、大蜜蜂（Apis dorsata）和小蜜蜂（Apis florea）亲缘关系较近;重组蛋白生物信息学分析显示,该蛋白的二级结构中共含有6个多肽结合位点、6个β-折叠和4个α-螺旋,分子质量约为16.13 ku,等电点为6.73;实时荧光定量PCR结果显示,Atg12基因在中蜂头部组织中表达极显著高于意蜂（P<0.01）。本试验结果为后续深入研究Atg12基因在中蜂抗螨上的作用机制提供了参考。
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