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【摘 要】目的：探讨老年人慢性阻塞性肺病（COPD）与肺炎衣原体感染（Cpn）之间的关系。方法：选择2008年7月-2012年7月入住我院经临床诊断为COPD的100例患者的临床资料，本组均为处于稳定期的COPD患者，并选取同期于我院进行健康体检的100例作为对照组。采用微量免疫荧光技术对两组血清脑炎衣原体特异性抗体IgA、IgG、IgM、FEV1、FVC以及圣乔治呼吸问卷（SGRQ）进行评分。结果：对照组Cpn感染的患者数为16例（占16.0%），观察组Cpn感染的患者数为64例（占64.0%），二组存在显著的统计学差异（P<0.01）；表征急性感染大的Cpn-Ag以及Cpn-IgM抗体的临床检出率方面，观察组要明显地高于对照组（P<0.01）；使用阿奇霉素治疗后，观察组患者的临床症状均出现明显改善，且治疗前后本组患者的生存质量呈现出显著的统计学差异（P<0.01），且SGRQ记分与FEV1/FVC的值显著增加，治疗前后存在显著统计学差异（P<0.01）同时观察组仅有Cpn-IgM滴度出现明显下降（P<0.01）；慢性COPD受衣原体感染与患者性别无关，但与吸烟及较大年龄相关。结论：肺炎衣原体与老年COPD存在一定的关系，可能是老年COPD发生及发展的独立危險因素。
【关键词】慢性阻塞性肺病（COPD）；肺炎衣原体（Cpn）；感染
【中图分类号】R56 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）09—0609—02
慢性阻塞性肺疾病（COPD），简称为“慢阻肺”，它是慢性气道阻塞性疾病的统称，主要包括如下两种疾病：慢性支气管炎与肺气肿。COPD是一种严重影响人类生命健康的疾病，预计到2020年底，该病将为全球第三大致死病因，其病死率位居呼吸系统疾病之首[1-2]。在2006年颁布的《全球倡议》一书中指出，全球范围之内，吸烟是COPD最为常见的一种危险性因素。但是流行病学资料显示其他各种病因也能够参与COPD的发生与发展过程之中，肺炎衣原体（Chlamydia Pneumoniae， Cpn）是引起急性以及慢性上、下呼吸道感染的重要原因，在临床上已经得到了证实[3-4]。本文主要对老年COPD的发生与肺炎衣原体之间的关系进行了初步探究，现报道如下。
1 资料及方法
1.1 临床资料
本研究资料源于2008年7月-2012年7月入住我院经临床诊断为COPD的100例老年患者的临床资料，均符合美国胸科学术委员会制定的COPD的入选标准。本组患者中，男性患者为56例，女性患者为44例；年龄为（61-83）岁，平均年龄为（72.2±6.9）岁；病程为（0.5-5）a，平均病程为（3.2±0.2）a；吸烟（533±134）支/a。选择同期前来我院进行体检的100名健康者作为对照组，其中男性患者为52例，女性患者为48例；年龄为（63-85）岁，平均年龄为（73.3±6.6）岁；病程为（0.5-6）a，平均病程为（3.6±0.1）a；吸烟（556±139）支/a。两组患者在一般资料方面无统计学差异（P>0.05），具有统计均衡性。
1.2 方法
1.2.1 临床检测
（1）单核细胞（PBMC）中Cpn-Ag的检测：首先抽取患者的静脉血3mL，使用EDTA抗凝，于2000rpm转速下进行离心，分离出血浆备用。PMBC的分离：剩余的血细胞使用等量的等渗PBS进行稀释、混匀，然后再沿着离心管壁缓缓加入到3mL的淋巴细胞分离液的离心管之中，然后于25℃温度条件下于2600rpm的转速离心0.5h，使用吸管将含有PMBC的云雾状层吸取出，使用低渗PBS洗涤PBMC 2-3次之后备用。然后，向每份PBMC的标本之中加入一定量的PBS溶液，并使其成为细胞悬液。分别向上述各标本取2份PBMC悬液10μL滴于同一个玻片之上，并滴成2个圆点，其中一个点作为空白对照组，将玻片放置于微波炉中低火1min、中火1.5min对抗原加以修复，然后使用丙酮对其进行固定。待室温冷却之后，在每张玻片的一个圆点上加上10μL的PBS，另外一个圆点上加入10μL的荧光素加以标记的肺炎衣原体单克隆抗体（FITC-TT-401）稀释液，然后置于37℃恒温水浴箱中孵育1.5h。孵育之后的玻片与PBS中清洗3次之后，再于蒸馏水之中清洗2-3次，吹风机吹干。荧光显微镜下观察大小均匀的特征性苹果绿亮点。测定点内的荧光亮点数减去空白点内的荧光亮点数之后的差值，作为判别Cpn-Ag阳性的标准。
（2）患者血浆中的Cpn-IgA、Cpn-IgG以及Cpn-IgM滴度检测：采用ELISA法进行测定。
（3）FEV1/FVC指标测定：使用COSMED肺功能测定仪对其进行测定、分析。
1.2.2 临床诊断标准
（1）COPD诊断标准：符合美国胸科学术委员会制定的COPD的诊断标准以及中华医学会呼吸病学分会所制定的COPD诊断分期分级标准；（2）Cpn标准：Cpn-IgA≥1：16，Cpn-IgG≥1：64以及IgM≥1：32。
1.2.3 阿奇霉素或安慰剂治疗研究
对照组Cpn感染患者使用安慰剂（单盲、淀粉片）进行治疗；观察组COPD患者中的Cpn感染者使用阿奇霉素进行治疗，每日口服阿奇霉素的剂量为15mg/kg，d2次，10d为一个疗程。患者在入住医院当天以及治疗结束后的第2d采集空腹血，用于对PBMC中的Cpn-Ag进行检测以及对Cpn抗体效价的变化进行检测。
1.3 统计学处理
数据均由SPSS16.0软件进行统计及分析，统计数据采取卡方检验，统计资料采取t检验，组间差异以P<0.05表示具有统计学意义。
2 结果
2.1 对照组与观察组的Cpn急、慢性感染率情况对比 见表1 。 2.2 两组Cpn感染者阿奇霉素或安慰剂治疗前后Cpn-IgA、Cpn-IgM以及Cpn-IgG滴度改变对比 见表2。
2.3 两组Cpn感染者阿奇霉素或安慰剂治疗前后临床症状评分及FEV1/FVC的变化 见表3。
2.4 相关性及回归性分析
对COPD和性别、年龄、吸烟以及Cpn滴度等指标进行相关性分析，结果显示COPD的发生与患者的性别无关，二者不存在统计学差异（P>0.05）；与吸烟、年龄、Cpn滴度均呈现出正相关性（P<0.05）。在对吸烟进行校正之后，多重线性回归性分析结果表明，P<0.0001，可信度区间为（42.128，66.277）。与年龄之间的P<0.05，与Cpn滴度的P<0.01，与SGFR计分的P<0.05.
3 讨论
国内外大量临床实践研究表明，超过80%的COPD患者均被肺炎衣原体（Cpn）不同程度地感染过，Cpn感染可能会参与到肺气肿与小气道疾病之中[5]。国内研究者对受到Cpn感染的COPD患者加用阿奇霉素进行治疗，临床效果比较理想，本研究主要采用了阿奇霉素对COPD患者进行治疗，从而探讨慢性Cpn感染以及COPD之间是否存在一定的相关性[6-7]。在Cpn感染患者之中，阿奇霉素能够较为明显地减少呼吸系统症状的发生率，尤其是COPD急性加重期。但是这并不是一种定论，因此对COPD稳定期或者慢性Cpn感染患者还需要进一步加以观察。慢性感染指标Cpn-IgA以及Cpn-IgG抗体滴度水平下降不存在显著性差异（P>0.05），这说明了阿奇霉素难以有效地杀灭肺炎衣原体，体外实验也证实阿奇霉素不能有效地杀灭肺炎衣原体。体内肺炎衣原体存在于单核细胞内，因此活抗原的存在不能被阿奇霉素根除，这可能与肺炎衣原体有独特的依赖宿主细胞的发育周期有关，这也为今后研究如何完全杀灭体内的肺炎衣原体提供新的研究方向[8-9]。
本文主要对采用微量免疫荧光技术对两组血清脑炎衣原体特异性抗体IgA、IgG、IgM、FEV1、FVC以及圣喬治呼吸问卷（SGRQ）进行评分。结果显示：对照组Cpn感染的患者数为16例（占16.0%），观察组Cpn感染的患者数为64例（占64.0%），二组存在显著的统计学差异（P<0.01）；表征急性感染大的Cpn-Ag以及Cpn-IgM抗体的临床检出率方面，观察组要明显地高于对照组（P<0.01）；使用阿奇霉素治疗后，观察组患者的临床症状均出现明显改善，且治疗前后本组患者的生存质量呈现出显著的统计学差异（P<0.01），且SGRQ记分与FEV1/FVC的值显著增加，治疗前后存在显著统计学差异（P<0.01）同时观察组仅有Cpn-IgM滴度出现明显下降（P<0.01）；慢性COPD受衣原体感染与患者性别无关，但与吸烟及较大年龄相关。综上所述，肺炎衣原体与老年COPD存在一定的关系，可能是老年COPD发生及发展的独立危险因素。
参考文献：
[1] 周海英，胡志雄，张熙，等. 慢性肺炎衣原体感染是慢性阻塞性肺病（COPD）的危险因子[J].中国人兽共患病学报，2011，27（8）：724-726.
[2] 吴家兵，胡岱霖，何凡，等.安徽省阜阳市首起恙虫病暴发疫情的流行病学调查[J].中华疾病控制杂志，2009，13（6）：65l一653.
[3] 汪茂荣，于乐成，何长伦。等.安徽地区一起恙虫病暴发流行的调查分析[J].中华实验和临床感染病杂志，2008，2（3）：174一177.
[4] 刘红，曹明华，张永根，等.安徽省不同地区人群和家畜恙虫病血清流行病学调查[J].安徽预防医学杂志，2010，16（1）：12一13.
[5] 胡志雄.周海英，张熙，等.克托霉素联合噻托溴胺治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）疗效[J].中国人兽共患病学报，2011，27（2）：120—123.
[6] Medinas Amoros M，Mas-Tous C，Renom—sotorra F，et a1.Health—related quality ofl.fe is associated with C（）PD severity：a comparison between the GOLD staging and the BODE index[J].Chron Respir Dis，2009，6（2）：75—80.
[7] Lee PI，wu MH，Huang M，et a1.An open randomized，comparative study of clarithrDmycin and erhromycin in the treatment of children with community-acquired pneumonia[J].J Microbiol Immunol Infect，2008，41（1）：54—61.
[8] 周海英，胡志雄，张熙，等. 慢性肺炎衣原体感染是慢性阻塞性肺病（CoPD）的危险因子[J]. 中国人兽共患病学报，2011，27（8）：724—726.
[9] 刘建锋，雷建平，徐华，等. 慢性阻塞性肺疾病肺炎衣原体感染的研究[J].江西医药，2008，43（12）：1278-1279.
【关键词】慢性阻塞性肺病（COPD）；肺炎衣原体（Cpn）；感染
【中图分类号】R56 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）09—0609—02
慢性阻塞性肺疾病（COPD），简称为“慢阻肺”，它是慢性气道阻塞性疾病的统称，主要包括如下两种疾病：慢性支气管炎与肺气肿。COPD是一种严重影响人类生命健康的疾病，预计到2020年底，该病将为全球第三大致死病因，其病死率位居呼吸系统疾病之首[1-2]。在2006年颁布的《全球倡议》一书中指出，全球范围之内，吸烟是COPD最为常见的一种危险性因素。但是流行病学资料显示其他各种病因也能够参与COPD的发生与发展过程之中，肺炎衣原体（Chlamydia Pneumoniae， Cpn）是引起急性以及慢性上、下呼吸道感染的重要原因，在临床上已经得到了证实[3-4]。本文主要对老年COPD的发生与肺炎衣原体之间的关系进行了初步探究，现报道如下。
1 资料及方法
1.1 临床资料
本研究资料源于2008年7月-2012年7月入住我院经临床诊断为COPD的100例老年患者的临床资料，均符合美国胸科学术委员会制定的COPD的入选标准。本组患者中，男性患者为56例，女性患者为44例；年龄为（61-83）岁，平均年龄为（72.2±6.9）岁；病程为（0.5-5）a，平均病程为（3.2±0.2）a；吸烟（533±134）支/a。选择同期前来我院进行体检的100名健康者作为对照组，其中男性患者为52例，女性患者为48例；年龄为（63-85）岁，平均年龄为（73.3±6.6）岁；病程为（0.5-6）a，平均病程为（3.6±0.1）a；吸烟（556±139）支/a。两组患者在一般资料方面无统计学差异（P>0.05），具有统计均衡性。
1.2 方法
1.2.1 临床检测
（1）单核细胞（PBMC）中Cpn-Ag的检测：首先抽取患者的静脉血3mL，使用EDTA抗凝，于2000rpm转速下进行离心，分离出血浆备用。PMBC的分离：剩余的血细胞使用等量的等渗PBS进行稀释、混匀，然后再沿着离心管壁缓缓加入到3mL的淋巴细胞分离液的离心管之中，然后于25℃温度条件下于2600rpm的转速离心0.5h，使用吸管将含有PMBC的云雾状层吸取出，使用低渗PBS洗涤PBMC 2-3次之后备用。然后，向每份PBMC的标本之中加入一定量的PBS溶液，并使其成为细胞悬液。分别向上述各标本取2份PBMC悬液10μL滴于同一个玻片之上，并滴成2个圆点，其中一个点作为空白对照组，将玻片放置于微波炉中低火1min、中火1.5min对抗原加以修复，然后使用丙酮对其进行固定。待室温冷却之后，在每张玻片的一个圆点上加上10μL的PBS，另外一个圆点上加入10μL的荧光素加以标记的肺炎衣原体单克隆抗体（FITC-TT-401）稀释液，然后置于37℃恒温水浴箱中孵育1.5h。孵育之后的玻片与PBS中清洗3次之后，再于蒸馏水之中清洗2-3次，吹风机吹干。荧光显微镜下观察大小均匀的特征性苹果绿亮点。测定点内的荧光亮点数减去空白点内的荧光亮点数之后的差值，作为判别Cpn-Ag阳性的标准。
（2）患者血浆中的Cpn-IgA、Cpn-IgG以及Cpn-IgM滴度检测：采用ELISA法进行测定。
（3）FEV1/FVC指标测定：使用COSMED肺功能测定仪对其进行测定、分析。
1.2.2 临床诊断标准
（1）COPD诊断标准：符合美国胸科学术委员会制定的COPD的诊断标准以及中华医学会呼吸病学分会所制定的COPD诊断分期分级标准；（2）Cpn标准：Cpn-IgA≥1：16，Cpn-IgG≥1：64以及IgM≥1：32。
1.2.3 阿奇霉素或安慰剂治疗研究
对照组Cpn感染患者使用安慰剂（单盲、淀粉片）进行治疗；观察组COPD患者中的Cpn感染者使用阿奇霉素进行治疗，每日口服阿奇霉素的剂量为15mg/kg，d2次，10d为一个疗程。患者在入住医院当天以及治疗结束后的第2d采集空腹血，用于对PBMC中的Cpn-Ag进行检测以及对Cpn抗体效价的变化进行检测。
1.3 统计学处理
数据均由SPSS16.0软件进行统计及分析，统计数据采取卡方检验，统计资料采取t检验，组间差异以P<0.05表示具有统计学意义。
2 结果
2.1 对照组与观察组的Cpn急、慢性感染率情况对比 见表1 。 2.2 两组Cpn感染者阿奇霉素或安慰剂治疗前后Cpn-IgA、Cpn-IgM以及Cpn-IgG滴度改变对比 见表2。
2.3 两组Cpn感染者阿奇霉素或安慰剂治疗前后临床症状评分及FEV1/FVC的变化 见表3。
2.4 相关性及回归性分析
对COPD和性别、年龄、吸烟以及Cpn滴度等指标进行相关性分析，结果显示COPD的发生与患者的性别无关，二者不存在统计学差异（P>0.05）；与吸烟、年龄、Cpn滴度均呈现出正相关性（P<0.05）。在对吸烟进行校正之后，多重线性回归性分析结果表明，P<0.0001，可信度区间为（42.128，66.277）。与年龄之间的P<0.05，与Cpn滴度的P<0.01，与SGFR计分的P<0.05.
3 讨论
国内外大量临床实践研究表明，超过80%的COPD患者均被肺炎衣原体（Cpn）不同程度地感染过，Cpn感染可能会参与到肺气肿与小气道疾病之中[5]。国内研究者对受到Cpn感染的COPD患者加用阿奇霉素进行治疗，临床效果比较理想，本研究主要采用了阿奇霉素对COPD患者进行治疗，从而探讨慢性Cpn感染以及COPD之间是否存在一定的相关性[6-7]。在Cpn感染患者之中，阿奇霉素能够较为明显地减少呼吸系统症状的发生率，尤其是COPD急性加重期。但是这并不是一种定论，因此对COPD稳定期或者慢性Cpn感染患者还需要进一步加以观察。慢性感染指标Cpn-IgA以及Cpn-IgG抗体滴度水平下降不存在显著性差异（P>0.05），这说明了阿奇霉素难以有效地杀灭肺炎衣原体，体外实验也证实阿奇霉素不能有效地杀灭肺炎衣原体。体内肺炎衣原体存在于单核细胞内，因此活抗原的存在不能被阿奇霉素根除，这可能与肺炎衣原体有独特的依赖宿主细胞的发育周期有关，这也为今后研究如何完全杀灭体内的肺炎衣原体提供新的研究方向[8-9]。
本文主要对采用微量免疫荧光技术对两组血清脑炎衣原体特异性抗体IgA、IgG、IgM、FEV1、FVC以及圣喬治呼吸问卷（SGRQ）进行评分。结果显示：对照组Cpn感染的患者数为16例（占16.0%），观察组Cpn感染的患者数为64例（占64.0%），二组存在显著的统计学差异（P<0.01）；表征急性感染大的Cpn-Ag以及Cpn-IgM抗体的临床检出率方面，观察组要明显地高于对照组（P<0.01）；使用阿奇霉素治疗后，观察组患者的临床症状均出现明显改善，且治疗前后本组患者的生存质量呈现出显著的统计学差异（P<0.01），且SGRQ记分与FEV1/FVC的值显著增加，治疗前后存在显著统计学差异（P<0.01）同时观察组仅有Cpn-IgM滴度出现明显下降（P<0.01）；慢性COPD受衣原体感染与患者性别无关，但与吸烟及较大年龄相关。综上所述，肺炎衣原体与老年COPD存在一定的关系，可能是老年COPD发生及发展的独立危险因素。
参考文献：
[1] 周海英，胡志雄，张熙，等. 慢性肺炎衣原体感染是慢性阻塞性肺病（COPD）的危险因子[J].中国人兽共患病学报，2011，27（8）：724-726.
[2] 吴家兵，胡岱霖，何凡，等.安徽省阜阳市首起恙虫病暴发疫情的流行病学调查[J].中华疾病控制杂志，2009，13（6）：65l一653.
[3] 汪茂荣，于乐成，何长伦。等.安徽地区一起恙虫病暴发流行的调查分析[J].中华实验和临床感染病杂志，2008，2（3）：174一177.
[4] 刘红，曹明华，张永根，等.安徽省不同地区人群和家畜恙虫病血清流行病学调查[J].安徽预防医学杂志，2010，16（1）：12一13.
[5] 胡志雄.周海英，张熙，等.克托霉素联合噻托溴胺治疗慢性阻塞性肺疾病（COPD）疗效[J].中国人兽共患病学报，2011，27（2）：120—123.
[6] Medinas Amoros M，Mas-Tous C，Renom—sotorra F，et a1.Health—related quality ofl.fe is associated with C（）PD severity：a comparison between the GOLD staging and the BODE index[J].Chron Respir Dis，2009，6（2）：75—80.
[7] Lee PI，wu MH，Huang M，et a1.An open randomized，comparative study of clarithrDmycin and erhromycin in the treatment of children with community-acquired pneumonia[J].J Microbiol Immunol Infect，2008，41（1）：54—61.
[8] 周海英，胡志雄，张熙，等. 慢性肺炎衣原体感染是慢性阻塞性肺病（CoPD）的危险因子[J]. 中国人兽共患病学报，2011，27（8）：724—726.
[9] 刘建锋，雷建平，徐华，等. 慢性阻塞性肺疾病肺炎衣原体感染的研究[J].江西医药，2008，43（12）：1278-1279.