【摘 要】
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目的探讨创伤后脾细胞活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells, NFAT)和激活蛋白-1 (activator protein-1, AP-1)的DNA结合活性、部分家族成员c-Fos, c-Jun和J
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,400042
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目的探讨创伤后脾细胞活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells, NFAT)和激活蛋白-1 (activator protein-1, AP-1)的DNA结合活性、部分家族成员c-Fos, c-Jun和JunB蛋白的表达和白细胞介素2(IL-2)表达的动态变化及它们间的关系.方法采用小鼠双后肢闭合性砸伤+骨折模型,于创伤后6h、12h、1、4、7、10和14天处死动物,分离脾细胞,经ConA刺激细胞后收集培养上清以测定IL-2活性;提取脾细胞RNA以测定IL-2 mRNA;提取脾细胞核蛋白,用电泳迁移率改变试验(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)检测NFAT和AP-1的DNA结合活性.用免疫蛋白印迹法(Western blot assay)检测c-Fos, c-Jun和JunB蛋白的表达.结果和正常对照组相比, 创伤后IL-2活性、IL-2 mRNA均有不同程度的降低, 其受抑的程度在创伤后4天更为明显.创伤后脾细胞NFAT和AP-1 的DNA结合活性亦逐渐下降,至伤后4天时下降最明显,为正常对照组的41%和49%.这与创伤后脾细胞IL-2的活性和IL-2 mRNA的降低相一致.c-Fos蛋白水平在伤后1和4天明显降低;c-Jun蛋白表达无明显变化;JunB蛋白水平仅在伤后1天明显表达.结论上述结果提示,创伤后脾细胞IL-2表达受抑至少部分上是由于核转录因子NFAT和AP-1的DNA结合活性降低所导致; 而NFAT和AP-1的DNA结合活性降低可能部分由于创伤影响c-Fos蛋白的生成所致.
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