【摘 要】
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目的:寻找一种能快速、准确检测冰冻切片为实验材料的原位细胞凋亡的TUNEL法。方法:在原已建立的TUNE技术基础上作了以下改进:(1)冰冻切片用微波修复暴露抗原;(2)冰冻切片用0
【机 构】
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大连医科大学机能实验室,大连医科大学生化教研室,
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目的:寻找一种能快速、准确检测冰冻切片为实验材料的原位细胞凋亡的TUNEL法。方法:在原已建立的TUNE技术基础上作了以下改进:(1)冰冻切片用微波修复暴露抗原;(2)冰冻切片用0.1%Triton X-100(用0.1%枸橼酸三钠水溶液配制)作穿透处理;(3)在滴加反应混合物前,冰冻切片用0.1%焦碳酸二乙酯水溶液(DEPC)浸泡,灭活内源性核酸内切酶;(4)苏木素套染细胞核。结果:改进后TUNEL法特异性地显示凋亡细胞的核呈棕黄色着染,其他细胞核为蓝色,且对比明显,背景浅,组织结构与细胞轮廓完整、清晰。结论:改进后TUNEL法是一种快速、准确检测冰冻切片为实验材料检测细胞凋亡的有效方法。
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