【摘 要】
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目的探讨佛司可林对人单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体活化及活化后白细胞介素-1β(IL-1β)炎性因子分泌的影响，从而为临床治疗小儿炎症性疾病提供参考。方法利用佛波酯诱导人单核细胞系THP-1细胞分化成巨噬细胞，尼日利亚菌素活化巨噬细胞，佛司可林(10、50、100 μmol/L)刺激活化的巨噬细胞；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测
【机 构】
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450052 郑州大学第一附属医院临床医学重点学科开放实验室；450052 郑州大学第一附属医院小儿尿动力学中心&泌尿外科,450052 郑州大学第一附属医院临床医学重点学科开放实验室；450
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目的探讨佛司可林对人单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)内核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体活化及活化后白细胞介素-1β(IL-1β)炎性因子分泌的影响，从而为临床治疗小儿炎症性疾病提供参考。
方法利用佛波酯诱导人单核细胞系THP-1细胞分化成巨噬细胞，尼日利亚菌素活化巨噬细胞，佛司可林(10、50、100 μmol/L)刺激活化的巨噬细胞；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测细胞炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP-3)、炎性因子IL-1β和Caspase-1 mRNA表达；Western blot法检测细胞炎症小体NLRP-3、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前体(pro-Caspase-1)和Caspase-1蛋白量的表达；酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎性因子IL-1β蛋白的表达。
结果尼日利亚菌素使THP-1巨噬细胞的NLRP-3、IL-1β和Caspase-1蛋白的mRNA表达分别提高为未激活组的7.59倍(P<0.001)、579.10倍(P<0.001)和3.59倍(P<0.001)，但佛司可林刺激对激活的THP-1巨噬细胞的炎症小体NLRP-3、炎性因子IL-1β和Caspase-1的mRNA表达无影响(P>0.05)。Western blot结果显示，佛司可林对激活的THP-1巨噬细胞的pro-IL-1β和pro-Caspase-1的蛋白量表达无明显影响(P>0.05)，但明显降低NLRP-3和Caspase-1的蛋白量表达(P<0.001)。ELISA结果提示，尼日利亚菌素使THP-1巨噬细胞的IL-1β的分泌由未激活量584.0 nmol/L升高到激活量2 695.6 nmol/L(t＝16.031 1，P<0.001)，而佛司可林10 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L分别可使激活量降为1 858.4 nmol/L(t＝5.365 5，P<0.001)、1 467.9 nmol/L(t＝8.047 5，P<0.001)和1 246.7 nmol/L(t＝10.199 1，P<0.05)。
结论佛司可林不影响激活的THP-1巨噬细胞炎症相关蛋白前体的基因转录和蛋白翻译表达，但降低其炎性因子IL-1β翻译后的蛋白分泌量，从而抑制炎性反应，可用于治疗由IL-1β引起的炎性疾病。
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