【摘 要】
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目的探讨HIV-1 Vpr蛋白对小鼠神经细胞的毒性作用。方法巢式PCR扩增了1例HIV相关痴呆(HIV associated dementia，HAD)和1例非HAD的艾滋病患者脾(spleen，SPL)、脑膜(meninges，MG)共4个部位的HIV-1 vpr基因测序，对基因序列和氨基酸位点进行分析。构建pEGFP-N1-vpr真核表达载体，脂质体法转染N2a细胞，Western blot检
【机 构】
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山东大学公共卫生学院卫生微生物学检验系，济南 250012,山东大学公共卫生学院卫生微生物学检验系，济南 250012,山东大学公共卫生学院卫生微生物学检验系，济南 250012,山东大学公共卫生学院
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目的探讨HIV-1 Vpr蛋白对小鼠神经细胞的毒性作用。
方法巢式PCR扩增了1例HIV相关痴呆(HIV associated dementia，HAD)和1例非HAD的艾滋病患者脾(spleen，SPL)、脑膜(meninges，MG)共4个部位的HIV-1 vpr基因测序，对基因序列和氨基酸位点进行分析。构建pEGFP-N1-vpr真核表达载体，脂质体法转染N2a细胞，Western blot检测Vpr蛋白在N2a细胞中的表达，流式细胞术研究了不同来源的Vpr蛋白对N2a细胞活性和细胞周期的影响。
结果PCR扩增出HIV-1 vpr基因，序列分析显示vpr基因序列属于HIV-1B亚型，HAD和非HAD患者中枢来源的Vpr蛋白在C末端84、86和87位存在氨基酸位点的突变；Vpr蛋白可抑制神经细胞活性，导致G2周期阻滞，不同来源的Vpr作用存在差异，HAD患者MG来源的Vpr蛋白，表现出更强的抑制细胞活性和G2周期阻滞能力。
结论Vpr蛋白关键氨基酸位点的变异可致其生物学功能的明显改变，其在HAD发病机制中的意义仍待进一步研究。
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