大鼠Aggrecanse-1,2特异性shRNA慢病毒表达载体的构建及测序

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目的:利用RNA干扰技术,以大鼠aggrecanse-1,2基因为靶基因,设计aggrecanse-1,2基因特异性的小干扰RNA(siRNA),构建其短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒表达载体,并进行测序鉴定。方法:根据Tuschl原则设计并合成大鼠aggrecanse-1,2基因特异性的DNA寡核苷酸,连接到经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切线性化的pKCSHR-GFP质粒上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。结果:将合成的8对大鼠aggrecanse-1
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