【摘 要】
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目的 观察苍术酮对肝癌HepG2细胞活性、凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 以肝癌HepG2细胞为研究对象,分为苍术酮低、中、高剂量组(5、10、20μmol/L),对照组加入等体积的DMSO.MMT比色法检测不同浓度苍术酮处理后HepG2细胞活性.流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率及线粒体膜电位.DCFH-DA荧光探针标记法检测HepG2细胞内ROS水平.Transwell实验检测苍术酮对HepG2细胞迁移能力的影响.蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平.
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203;上海浦东新区传染病医院肝病科,上海201299;上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所,上海201203;上海浦东新区传染病医院肝病科,上海201
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目的 观察苍术酮对肝癌HepG2细胞活性、凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 以肝癌HepG2细胞为研究对象,分为苍术酮低、中、高剂量组(5、10、20μmol/L),对照组加入等体积的DMSO.MMT比色法检测不同浓度苍术酮处理后HepG2细胞活性.流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率及线粒体膜电位.DCFH-DA荧光探针标记法检测HepG2细胞内ROS水平.Transwell实验检测苍术酮对HepG2细胞迁移能力的影响.蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平.计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间的两两比较采用LSD-t检验.结果 在苍术酮处理细胞24、48 h后,与对照组同一时间相比,苍术酮低、中、高剂量组的细胞活性呈下降趋势,且差异均有统计学意义(P值均<0.05),苍术酮处理HepG2细胞72 h的半数抑制率为26.19μmol/L.苍术酮低、中、高剂量组的细胞凋亡率分别为14.34％、29.32％和50.12％,均高于对照组(0.32％)(P值均<0.05).与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组HepG2细胞中ROS的荧光强度明显升高(P值均<0.05).在苍术酮处理HepG2细胞48 h后,与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组的细胞迁移数量明显降低(132.67±18.36、57.00±9.26、31.00±2.45 vs 258.11±38.54,P值均<0.05);与对照组比较,苍术酮低、中、高剂量组能显著抑制抗凋亡因子Bcl-2的表达,促进凋亡因子Bax和Cleaved caspase-3的表达,差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 苍术酮能够诱导HepG2细胞凋亡,并抑制其迁移,为进一步开发利用苍术酮提供一定的实验基础.
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