【摘 要】
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由多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)导致的酶促褐变严重影响莲子的外观。本研究旨在探讨莲子PPO的提取纯化方法,为研究其蛋白结构、进一步探究莲子褐变机理提供理论依据。
【机 构】
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南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(31301578);江西省自然科学基金(20132BAB214002);江西省教育厅青年科学基金(GJJ13024);江西省自然青年科学基金(20142BAB214003)
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由多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)导致的酶促褐变严重影响莲子的外观。本研究旨在探讨莲子PPO的提取纯化方法,为研究其蛋白结构、进一步探究莲子褐变机理提供理论依据。以酶活力和酶比活力为指标,对比了提取PPO的四种方法,发现匀浆吸附后丙酮沉淀法提取莲子PPO可获得较高的酶比活力,达289.04 U/mg;采用单因素实验对该提取方法进行优化,得最佳提取参数为:料液比1∶5、提取时间2 h、p H=7、含2%PVPP和0.8%Triton X-100提取溶液,优化后PPO粗酶液酶比活力为294.40 U/mg;采用DEAE Sepharose Fast FLow阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶柱层析对粗酶液进行纯化,得到分子量大约为58 ku莲子PPO,酶比活力为7926.68 U/mg,纯化倍数为26.92,回收率为38.48%。
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