【摘 要】
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目的构建绛红色小单孢菌（Micromonosporapurpurea）的接合转移体系，并对该体系进行优化。方法以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板，经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各200
【机 构】
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福州大学生物科学与工程学院,常州方圆制药有限公司
【基金项目】
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国家自然科学基金(项目编号:31070093/30801449)
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目的构建绛红色小单孢菌（Micromonosporapurpurea）的接合转移体系，并对该体系进行优化。方法以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板，经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各2000bp左右作为同源交换臂，并将红霉素抗性基因作为筛选标记插入两交换臂之间。以温敏型质粒pKC1139作为基本载体，构建重组质粒pFD306。借助接合转移技术，将该质粒导入绛红色小单孢菌G1008。结果经抗性筛选，得到一株阳性菌株，命名为GK1008，经PCR鉴定和测序，验证了重组质粒已整合到染色体上。
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