乙型肝炎病毒表达载体pHY106在筛选抗病毒药物中的意义

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fancysoul
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目的 应用新的HBV表达载体,建立体外筛选临床抗HBV药物的方法.方法 克隆对拉米夫定耐药的CHB患者体内HBV全基因组,然后将其亚克隆到HBV真核表达载体pHY106,体外转染Huh7细胞,检测转染后不同时间HBsAg、HBeAg、HBV DNA及HBV复制中间体水平.分析拉米夫定和阿德福韦对HBV基因表达和复制的抑制作用,指导临床用药.结果 成功构建全部8个HBV临床分离株全基因组真核表达质粒,HBV聚合酶基因YMDD有5个产生YVDD突变,3个产生YIDD突变.该质粒上HBV基因能在Huh7细胞中进行复制和表达,拉米夫定不能体外抑制HBV复制,阿德福韦抑制了HBV在Huh7细胞中的复制,抑制程度与药物浓度相关.阿德福韦在患者体内也抑制了HBV的复制.结论 新建立的体外筛选抗HBV药物的方法能用于临床快速筛选抗HBV药物,对CHB的治疗用药具有指导意义.
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