【摘 要】
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为了建立能够猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）和非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）双重荧光定量PCR方法，试验比对了CSFV与ASFV的基因组序列，针对CSFV 5′-UTR和ASFV B646L保守靶序列，分别设计2条特异性引物及1条TaqMan探针，通过优化扩增体系和程序，建立可同时检测CSFV和ASFV的
【基金项目】
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黑龙江省重点研发项目（GA21B004）； 黑龙江省农垦总局重点科研计划项目（HKKYZD190309）；
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为了建立能够猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）和非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）双重荧光定量PCR方法，试验比对了CSFV与ASFV的基因组序列，针对CSFV 5′-UTR和ASFV B646L保守靶序列，分别设计2条特异性引物及1条TaqMan探针，通过优化扩增体系和程序，建立可同时检测CSFV和ASFV的双重荧光定量PCR方法，并建立该方法的标准曲线，同时用敏感性试验、特异性试验和重复性试验对该方法进行评价，最后检验该方法的应用效果。结果表明：CSFV和ASFV标准曲线的相关系数（R~2）分别为0.999和1,线性关系良好；CSFV与ASFV的最低检测浓度分别为1.3×10~0 copies/μL和2.4×10~0 copies/μL;与其他常见猪只病原检测无交叉反应；批间与批内变异系数均小于2%,稳定性良好。试验建立的方法对44份临床样本的检测结果与《猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法》（GB/T 27540—2011）和《非洲猪瘟诊断技术》（GB/T 18648—2020）检测结果一致。说明试验建立的双重荧光定量PCR方法敏感、特异、稳定，可用于CSFV和ASFV的快速检测和鉴别诊断。
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