【摘 要】
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用抗细粒棘球蚴B抗原(EgB)多克隆抗体筛选噬菌体随机7肽库.经过5轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的4.15×10-5增加到第5轮的4.30×10-2,说明阳性克隆得到富集.随机挑取60个蓝色
【机 构】
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新疆医科大学第一附属医院麻醉科,乌鲁木齐市,830054
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用抗细粒棘球蚴B抗原(EgB)多克隆抗体筛选噬菌体随机7肽库.经过5轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的4.15×10-5增加到第5轮的4.30×10-2,说明阳性克隆得到富集.随机挑取60个蓝色噬菌斑进行扩增,对其核苷酸序列进行测定分析并与EgB进行同源性比较.采用ELISA法对阳性噬菌体与抗EgB多克隆抗体结合特性进行检测,共检测出45个与抗EgB多克隆抗体结合的克隆株(阳性率为75%),其递呈的七肽序列与EgB的同源性低.采用ELISA法检测所选多肽对棘球蚴病所致过敏性休克患者抗血清的反应性,结果显示,细粒棘球蚴病患者抗血清与45个阳性噬菌体克隆反应的吸光度(A410值)比其与7肽库反应的A410值大2倍以上, 该45个阳性噬菌体克隆与EgB多克隆抗体的结合是特异的.提示成功分析细粒棘球蚴囊液B抗原肽表位以及模拟表位.
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