【摘 要】
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利用黑曲霉自身强启动子(葡萄糖淀粉酶启动子,PglaA)实现了酸性果胶裂解酶PelD在黑曲霉中的过量表达,重组酸性果胶裂解酶经镍柱亲和层析纯化后进行Western blot鉴定及酶学性
【机 构】
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华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（31871736;31870024）;广东省自然科学基金项目（2017A030313097）;广东省科技计划项目（2016A050503016;2016A010105004）
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利用黑曲霉自身强启动子(葡萄糖淀粉酶启动子,PglaA)实现了酸性果胶裂解酶PelD在黑曲霉中的过量表达,重组酸性果胶裂解酶经镍柱亲和层析纯化后进行Western blot鉴定及酶学性质研究。重组酸性果胶裂解酶在摇瓶发酵条件下最高酶活力达到8 822.6 U/mL;经一步纯化后,该重组酶的比活力为8 522.7 U/mg,回收率为79.4%;该重组酶的最适反应pH值为5.0,在pH 3.0~6.5范围内40℃保温2 h仍能保持50%以上的相对酶活力,在酸性pH值下稳定性良好;最适反应温度为50℃,该重组酶
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